月季组织培养(ROSE TISSUE CULTURE)

摘  要：随着月季新培育和引进的品种越来越多，传统的扦插繁殖方法已经不能满足月季生产发展的需要，而组织培养解决了传统月季的繁殖方法繁殖速度慢，繁殖数量少，满足不了生产发展的需求等问题，使得其可以在短期内获得大量的优良种苗。为此，在此做了一些研究期望能促进月季组织培养快速繁殖使其能扩大生产。本次实验采用月季的当年生带腋芽的茎段进行组织培养，使其在培养基中增殖形成愈伤组织，再对其进行诱导生根，从而产生成苗。不仅分析了月季组织培养过程中的影响因素，还在采用加入不同浓度的6-BA搭配不同浓度的NAA的培养基来进行试管苗移摘基质的筛选，结果表明：适宜的诱导培养基为MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0．05 mg/L,每个腋芽长出6个以上的丛生芽。由此可以得出在MS培养基内加入不同浓度不同种类的植物生长调节剂会使外植体发生不同程度的生长或者死亡。
关键词：月季；组织培养；外植体；培养基

ROSE TISSUE CULTURE
Abstract：With  the  rose cultivation and the more and more varieties be Introduced from elsewhere . The traditional cutting propagation methods have been unable to meet the needs of the development of production rose,and rose tissue culture propagation to solve the traditional method of slow propagation, breeding a small number that can  not  meet the needs of the development of production and other problems,so that making it available in the near future get a large number of good seeds.To do this, do some research in the hope that this can promote the rapid propagation of rose tissue culture to enable them to expand production.This study used  the rose's current year stem segments with axillary buds with tissue grooming, resulting in seedling，proliferation in the medium  to  callus  induction and then its root . Not only analyzes the process of the rose tissue grooming factors,and also specifically , also with different concentrations of 6-BA with different concentrations of NAA in the medium to be shifted abstract vitro substrate screening .  The results
showed that the suitable induction culture media was MS+ 6-BA 0.5 mg/L+ NAA 0.05 mg/L，each axillary buds grow six buds.From this，we know the  MS medium with different concentrations of plant growth regulators cause different types of explants to varying degrees of growth or death.
Key words：Rosa hybrida；tissue culture；explant；culture medium   

月季的组织培养
     植物的组织培养技术是应用无菌操作的方法，培养植物的离体器官、组织或细胞，使植株再生的一种无性繁殖手段，此方法是在20世纪30年代才出现的。目前月季的繁殖技术依旧采用的是传统的扦插、嫁接等方法，限制了月季的繁殖量，短期内难以推广，不能满足月季工厂化大生产发展的需要。对月季而言，早在1980年Hasegawa[17]就用攀援月季“Improved fire”的茎尖或休眠芽为材料，在MS培养基上建立了试管苗无性系，且其他一些研究者也先后用月季的茎尖和腋芽诱导出了完整的植株[18,19]。
对于月季组织培养技术而言，外植体的茎段培养是最直接、最简便、成苗速度最快的—种手段 ，几乎所有研究组织培养的工作者都会利用这种培养方式。茎段培养的月季的再生方式是通过顶芽和腋芽的发育实现的，顶芽和腋芽在离体培养中都可被诱导而发育，单个的芽可萌发出单一的苗或多个苗。月季离体快速繁殖也可通过愈伤组织诱导不定芽的分化[20]、体细胞胚胎发生[21]、花药培养[22]来实现。
影响月季组织培养的外界条件还有光通密度(PPFD)、温度以及添加剂等。在强光条件下，嫩茎增殖最多，但叶子衰老的程度也最显著。月季茎增殖受温度的影响较小，但根的发育对温度的变化相当敏感。21℃下根的生长远远优于16℃和26℃。而活性炭作为一种吸附剂，在植物组织培养中可起到抑止褐化、促进生根等众多作用[23]。有研究认为活性炭只能对某些品种月季嫩茎生根有良好影响，但并不影响另一些品种月季的生根[24]。

目    录     9500字
摘要……………………………………………………………………………1
关键词…………………………………………………………………………1
1综述…………………………………………………………………………………2
1.1组织培养的研究进展……………………………………………………………2
1.1.1丛生芽的诱导 ……………………………………………………………3
1.1.2体细胞胚状体的发生………………………………………………………3
1.1.3植株再生…………………………………………………………………3
1.1.4愈伤组织的诱导………………………………………………………4
1.1.5器官发生…………………………………………………………………4
1.2月季的组织培养………………………………………………………………4
2技术路线………………………………………………………………………5
3材料与方法…………………………………………………………………5
3.1无菌体系的建立 ………………………………………………………5
3.1.1选材………………………………………………………………………5
3.1.2培养基的配置………………………………………………………………5
3.1.3消毒灭菌………………………………………………………………………6
3.1.4清洗外植体……………………………………………………………………6
3.1.5初代接种 …………………………………………………………………6
3.2继代培养…………………………………………………………………6
3.3生根培养…………………………………………………………………7
3.4试管苗移摘与管理技术…………………………………………………7
4结果与分析…………………………………………………………………7
4.1实验结果…………………………………………………………………7
4.2分析…………………………………………………………………………8
4.2.1外植体的选择……………………………………………………………8
4.2.2培养基………………………………………………………………………8
4.2.3植物生长调节剂………………………………………………………………9
4.2.4高压灭菌……………………………………………………………………9
4.2.5外植体的消毒灭菌…………………………………………………………9
4.2.6培养条件……………………………………………………………………9
5结论………………………………………………………………………………10
参考文献 ……………………………………………………………………………10
致谢…………………………………………………………………………………12
附录…………………………………………………………………………………13