三角帆蚌溶菌酶基因的克隆

摘  要：三角帆蚌Hyriopsiscumingii是我国重要的“淡水育珠蚌”之一，开展其分子免疫的研究不仅具有理论意义，而且具有重要的应用价值。而溶菌酶lysozyme具有抗菌消炎和抗病毒作用，本文旨在以三角帆蚌肝脏组织细胞为实验材料，用Trizol的方法抽提出lysozyme的总RNA，再用RACE ( rapid amplification of cDNA ends)技术逆转录扩增其cDNA，通过对cDNA的测序和结构功能的分析，为后续的分子生物学实验和三角帆蚌新品种的培育奠定基础。本次试验成功地获取了5’-RACE片段，大小约为340bp。
关键词：三角帆蚌；lysozyme；Trizol；RACE

Cloning of Cumingii Lysozyme Gene
Abstract:Hyriopsis cumingii  is one of the most important freshwater mussel. Carrying out the study on molecular immunology not only has theoretical meaning,but also has crucial applying values. This paper is intended to take the tissue cells of cumingii as the experimental materials, then extracted the overall RNA in method of Trizol and RACE(rapid amplification of cDNA ends) to reverse transcription amplified the cDNA. The subsequent molecular biology experiments and cultivating of new varieties are laid foundation by the analysis of sequencing and structural function on cDNA. In this experiment , the 5'-RACE fragment(approximately 340 bp) were obtained successfully ,
Key words: Hyriopsis cumingii ；lysozyme；Trizol；RACE

目    录      6800字
摘  要    1
关键词    1
1  前言    1
1.1  三角帆蚌    1
1.2  克隆lysozyme基因的意义    2
1.2.1　溶菌酶的性质    2
1.2.2  溶菌酶的来源    2
1.2.3  溶菌酶的抑菌机理及抑菌谱    2
1.2.4  溶菌酶的功能    3
1.3  lysozyme的研究现状    4
1.3.1　溶菌酶在水产养殖业中的应用    4
1.3.2　溶菌酶在饲料中的应用    4
2  试验材料与方法    4
2.1  试验材料    4
2.1.1  试验材料    4
2.1.2  主要仪器    4
2.1.3  供试药品及器具    5
2.2  试验方法    5
2.2.1  RNA提取    5
2.2.2  RACE    5
2.2.3  电泳检测    8
3  结果与分析    9
3.1  RNA抽提结果    9
3.2  引物    10
3.3  RACE扩增结果    10
4 结论与展望    10
4.1  结论    10
4.2  有待深入研究的内容    11
参考文献    11
致    谢    12