茶陵野生稻抗冻相关转录因子的克隆及研究

茶陵野生稻抗冻相关转录因子的克隆及研究(含选题审批表,任务书,开题报告,中期检查表,毕业论文8000字)
摘 要：低温胁迫下利用RT-PCR技术获得了茶陵野生稻DREB类转录因子的cDNA全长。通过序列分析表明：此基因核苷酸序列全长为958bp，编码314个氨基酸，该序列与水稻DREB基因的同源性98%，与小麦CBF/DREB基因的同源性为86%，与大麦CRT/DREB基因和玉米DBP3蛋白的cDNA序列同源性分别为80%、81%；推导的蛋白第43-112位氨基酸为一个典型AP2结构，因此具有AP2/DREB类转录因子的基本结构特征。为进一步通过转基因技术研究该基因的功能奠定了基础。
关键词：茶陵野生稻；DREB转录因子；基因克隆。

Cloning and Investigation of Anti-frozen Related Transcription Factor from Chaling Wild Rice
Abstract：The cDNA of DREB transcription factor was obtained from Chaling wild rice under low temperature by RT-PCR method. The sequence analysis indicated: the clone was consisted of 958 bp, coding 314 amino acids, the homlogous of sequence from Oryza sativa is 98%, and 86% from Triticum aestivum CBF/DREB, the homlogous from Hordeum vulgare and Zea mays is 80% and 81%, The deduced primary structure of DREB contained a single AP2 domain and showed the typical characteristics of DREB gene family. This work laid the foundations for future transgenic research on DREB gene function.
  Key words：Chaling wild rice, DREB transcription factor, gene cloning.

研究方案（研究目的、内容、方法、预期成果、条件保障等）
研究目的：以低温胁迫的茶陵野生稻为材料，获得了野生稻DREB1基因的cDNA编码序列，说明该基因受低温诱导。
研究内容：茶陵野生稻DREB类转录因子的克隆。
研究方法：提取野生稻RNA将其反转成CDNA，设计引物进行PCR扩增，构建T载体转化到Eeoli。测定序列，进行Blast比对。最后进行蛋白质分析。
预期成果：获得野生稻DREB1基因的cDNA编码序列，说明该基因受低温

目  录
摘要……………………………………………………………………………1
关键词…………………………………………………………………………1
1前言……………………………………………………………………………1
2材料与方法……………………………………………………………………4
     2.1材料 …………………………………………………………………4
         2.1.1实验材料………………………………………………………………4
         2.1.2主要仪器………………………………………………………………4
         2.1.3药剂与试剂………………………………………………………………4
     2.2 实验方法 ……………………………………………………………………4
         2.2.1引物的设计与合成……………………………………………………4
         2.2.2材料的处理及RNA的提取准备工作……………………………………4
         2.2.3目的基因的克隆…………………………………………………………5
         2.2.4连接产物的转化…………………………………………………………7
         2.2.5目的基因的检测与测序…………………………………………………8
         2.2.6序列分析…………………………………………………………9
3结果与分析………………………………………………………………9
      3.1野生稻总RNA提取………………………………………………………………9
      3.2目的基因克隆………………………………………………………………10
      3.2序列及蛋白质结构分析………………………………………………………11
      3.3讨论………………………………………………………………13
参考文献 ………………………………………………………………………14
致谢……………………………………………………………………………15