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茶陵野生稻抗冻相关转录因子的克隆及研究

来源:wenku163.com  资料编号:WK1637799 资料等级:★★★★★ %E8%B5%84%E6%96%99%E7%BC%96%E5%8F%B7%EF%BC%9AWK1637799
资料介绍

茶陵野生稻抗冻相关转录因子的克隆及研究(含选题审批表,任务书,开题报告,中期检查表,毕业论文8000字)
摘 要:低温胁迫下利用RT-PCR技术获得了茶陵野生稻DREB类转录因子的cDNA全长。通过序列分析表明:此基因核苷酸序列全长为958bp,编码314个氨基酸,该序列与水稻DREB基因的同源性98%,与小麦CBF/DREB基因的同源性为86%,与大麦CRT/DREB基因和玉米DBP3蛋白的cDNA序列同源性分别为80%、81%;推导的蛋白第43-112位氨基酸为一个典型AP2结构,因此具有AP2/DREB类转录因子的基本结构特征。为进一步通过转基因技术研究该基因的功能奠定了基础。
关键词:茶陵野生稻;DREB转录因子;基因克隆。

Cloning and Investigation of Anti-frozen Related Transcription Factor from Chaling Wild Rice
Abstract:The cDNA of DREB transcription factor was obtained from Chaling wild rice under low temperature by RT-PCR method. The sequence analysis indicated: the clone was consisted of 958 bp, coding 314 amino acids, the homlogous of sequence from Oryza sativa is 98%, and 86% from Triticum aestivum CBF/DREB, the homlogous from Hordeum vulgare and Zea mays is 80% and 81%, The deduced primary structure of DREB contained a single AP2 domain and showed the typical characteristics of DREB gene family. This work laid the foundations for future transgenic research on DREB gene function.
  Key words:Chaling wild rice, DREB transcription factor, gene cloning.

研究方案(研究目的、内容、方法、预期成果、条件保障等)
研究目的:以低温胁迫的茶陵野生稻为材料,获得了野生稻DREB1基因的cDNA编码序列,说明该基因受低温诱导。
研究内容:茶陵野生稻DREB类转录因子的克隆。
研究方法:提取野生稻RNA将其反转成CDNA,设计引物进行PCR扩增,构建T载体转化到Eeoli。测定序列,进行Blast比对。最后进行蛋白质分析。
预期成果:获得野生稻DREB1基因的cDNA编码序列,说明该基因受低温

目  录
摘要……………………………………………………………………………1
关键词…………………………………………………………………………1
1前言……………………………………………………………………………1
2材料与方法……………………………………………………………………4
     2.1材料 …………………………………………………………………4
         2.1.1实验材料………………………………………………………………4
         2.1.2主要仪器………………………………………………………………4
         2.1.3药剂与试剂………………………………………………………………4
     2.2 实验方法 ……………………………………………………………………4
         2.2.1引物的设计与合成……………………………………………………4
         2.2.2材料的处理及RNA的提取准备工作……………………………………4
         2.2.3目的基因的克隆…………………………………………………………5
         2.2.4连接产物的转化…………………………………………………………7
         2.2.5目的基因的检测与测序…………………………………………………8
         2.2.6序列分析…………………………………………………………9
3结果与分析………………………………………………………………9
      3.1野生稻总RNA提取………………………………………………………………9
      3.2目的基因克隆………………………………………………………………10
      3.2序列及蛋白质结构分析………………………………………………………11
      3.3讨论………………………………………………………………13
参考文献 ………………………………………………………………………14
致谢……………………………………………………………………………15

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